本書內(nèi)容包括臨床分子生物學(xué)檢驗實(shí)驗室規(guī)則及常用儀器、臨床分子生物學(xué)檢驗基本技術(shù)和臨床分子生物學(xué)檢驗技術(shù)綜合實(shí)驗內(nèi)容,并將常用試劑和緩沖液的配置作為附錄。在保留上一版特色的基礎(chǔ)上,秉持繼承、發(fā)揚(yáng)、創(chuàng)新的精神,堅持實(shí)驗內(nèi)容和專業(yè)知識的掛鉤,做到理論聯(lián)系實(shí)際,注重基礎(chǔ)和臨床的結(jié)合,既突出實(shí)用性和可操作性,又兼顧拓展性和創(chuàng)新性。文末附錄常用試劑和緩沖液配置,方便教學(xué)使用。內(nèi)容包括各章學(xué)習(xí)目標(biāo)、重點(diǎn)和難點(diǎn)內(nèi)容,滿足學(xué)生復(fù)習(xí)、理解并扎實(shí)掌握所學(xué)知識。
第一章 臨床分子生物學(xué)檢驗實(shí)驗室規(guī)則及常用儀器/1
第一節(jié) 臨床分子生物學(xué)檢驗實(shí)驗守則 / 1
第二節(jié) 臨床分子生物學(xué)檢驗實(shí)驗室安全管理制度 / 3
第三節(jié) 臨床分子生物學(xué)檢驗實(shí)驗室安全應(yīng)急預(yù)案 / 4
第四節(jié) 臨床分子生物學(xué)檢驗實(shí)驗室常用儀器介紹 / 5
第二章 臨床分子生物學(xué)檢驗基本技術(shù)/9
第一節(jié) 核酸的分離、純化與鑒定技術(shù) / 9
實(shí)驗一 基因組DNA 的分離與純化/ 9
實(shí)驗二 RNA 的分離與純化/ 13
實(shí)驗三 質(zhì)粒DNA 的提取與純化/ 17
實(shí)驗四 核酸的鑒定與分析 / 19
第二節(jié) 核酸擴(kuò)增技術(shù) / 29
實(shí)驗五 PCR 技術(shù) / 29
實(shí)驗六 RT-PCR 技術(shù) / 33
實(shí)驗七 熒光定量PCR 技術(shù) / 37
第三節(jié) 核酸分子雜交及芯片技術(shù) / 41
實(shí)驗八 DNA 分子雜交 / 42
實(shí)驗九 RNA 分子雜交/ 45
實(shí)驗十 熒光原位雜交 / 48
實(shí)驗十一 DNA 芯片技術(shù) / 51
第四節(jié) 核酸測序及生物信息學(xué)分析技術(shù) / 54
實(shí)驗十二 雙脫氧鏈終止測序法 / 54
實(shí)驗十三 高通量測序法 / 58
實(shí)驗十四 測序數(shù)據(jù)的比對分析 / 61
實(shí)驗十五 基因功能與通路分析 / 64
第五節(jié) 重組DNA 技術(shù) / 66
實(shí)驗十六 DNA 的限制性核酸內(nèi)切酶酶切反應(yīng) / 67
實(shí)驗十七 DNA 片段的回收 / 69
實(shí)驗十八 DNA 的重組連接 / 70
實(shí)驗十九 感受態(tài)細(xì)胞的制備及重組子轉(zhuǎn)化 / 72
實(shí)驗二十 重組子的篩選與鑒定 / 75
第六節(jié) 蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù) / 81
實(shí)驗二十一 雙向凝膠電泳技術(shù) / 81
實(shí)驗二十二 蛋白質(zhì)印跡技術(shù) / 86
第三章 臨床分子生物學(xué)檢驗綜合性實(shí)驗/92
第一節(jié) 感染性疾病的分子生物學(xué)檢驗 / 92
實(shí)驗二十三 甲、乙型流感病毒核酸檢測 / 92
實(shí)驗二十四 結(jié)核分枝桿菌核酸檢測 / 95
實(shí)驗二十五 人乳頭瘤病毒基因分型檢測 / 97
實(shí)驗二十六 丙型肝炎病毒基因分型檢測 / 101
第二節(jié) 遺傳性疾病的分子生物學(xué)檢驗 / 104
實(shí)驗二十七 地中海貧血致病基因檢測 / 104
實(shí)驗二十八 進(jìn)行性假肥大性肌營養(yǎng)不良相關(guān)基因檢測 / 110
實(shí)驗二十九 遺傳性耳聾相關(guān)基因檢測 / 113
第三節(jié) 腫瘤的分子生物學(xué)檢驗 / 116
實(shí)驗三十 白血病融合基因BCR-ABL 檢測 / 116
實(shí)驗三十一 人表皮生長因子受體-2 基因檢測 / 119
實(shí)驗三十二 表皮生長因子受體基因(EGFR)突變檢測 / 122
第四節(jié) 藥物代謝及個體識別的分子生物學(xué)檢驗 / 126
實(shí)驗三十三 華法林代謝酶基因檢測 / 126
實(shí)驗三十四 葉酸代謝酶基因檢測 / 129
實(shí)驗三十五 HLA 基因分型檢測 / 132
第四章 臨床分子生物學(xué)檢驗創(chuàng)新設(shè)計性實(shí)驗/ 136
實(shí)驗三十六 乙型肝炎病毒DNA 檢測標(biāo)準(zhǔn)品的制備/ 136
實(shí)驗三十七 熒光定量PCR 高分辨率熔解曲線分析檢測基因點(diǎn)突變 / 138
實(shí)驗三十八 線粒體DNA 的異質(zhì)性突變檢測/ 139
實(shí)驗三十九 肺癌液體活檢 / 140
實(shí)驗四十 宏基因組測序用于難治性感染的檢測 / 142
附錄 臨床分子生物學(xué)檢驗技術(shù)實(shí)驗常用緩沖液與試劑的配制/ 144